Page 53 - FoodFocusThailand No.218 MAY 2024

STRONG QC & QA

เวิลารวิมที่ั�งหมดีไม�เกิน 90 นาที่ี โดียเที่ค์นิค์ดีังกล�าวิไดี้รับการยืนยัน
ป็ระสัิที่ธีิภาพิ่ (Validation) เมื�อ็เที่ียบกับเที่ค์นิค์มาตรฐาน Real-time
PCR ซึ่่�งให้ผ่ลที่ี�สัอ็ดีค์ล้อ็งกัน และพิ่บวิ�ามีค์วิามจำำาเพิ่าะต�อ็สััตวิ์
เป็้าหมายและสัามารถูตรวิจำวิัดีดีีเอ็็นเอ็ขอ็งสััตวิ์ต้อ็งห้ามที่่กชนิดีไดี้ที่ี�
ค์วิามเข้มข้น 0.01 ppm
นวิัตกรรมช่ดีตรวิจำสัอ็บสััตวิ์ต้อ็งห้ามแบบรวิดีเร็วิดีังกล�าวิ สัามารถู
ลดีต้นที่่นในการตรวิจำวิิเค์ราะห์ที่างห้อ็งป็ฏิิบัติการไดี้ โดียสัามารถู

ตรวิจำสัอ็บวิัตถู่ดีิบและผ่ลิตภัณฑ์์สัำาเร็จำรูป็ดี้วิยตนเอ็งก�อ็นนำามาผ่ลิต
เป็็นผ่ลิตภัณฑ์์ รวิมถู่งช�วิยลดีเวิลาและต้นที่่นในการสั�งตรวิจำสัอ็บที่าง
หลัักการทำงานของเทคนิค multiplex PCR ร่วมกับ ห้อ็งป็ฏิิบัติการอ็ีกดี้วิย อ็ีกที่ั�งช่ดีตรวิจำสัอ็บนี�ยังเหมาะสัำาหรับหน�วิยงาน
DNA strip ตรวิจำสัอ็บค์่ณภาพิ่ผ่ลิตภัณฑ์์ฮาลาล เนื�อ็งจำากผู่้ตรวิจำป็ระเมินสัามารถู
Multiplex PCR เป็็นวิิธีีการเพิ่ิ�มจำำานวินดีีเอ็็นเอ็เป็้าหมาย นำาช่ดีนี�ไป็ป็ระย่กต์ใช้ในการตรวิจำวิัดีที่ี�หน้างานไดี้ อ็ย�างไรก็ตาม
หลายกล่�มในหลอ็ดีป็ฏิิกิริยาเดีียวิกัน โดียมีอ็งค์์ป็ระกอ็บหลัก นวิัตกรรมนี�ยังไม�เหมาะกับผู่้บริโภค์ที่ั�วิไป็ เนื�อ็งจำากเที่ค์นิค์ที่ี�พิ่ัฒนาข่�นนั�น
ค์ือ็ ดีีเอ็็นเอ็แม�แบบขอ็งสััตวิ์เป็้าหมายแต�ละชนิดี และไพิ่รเมอ็ร์ เป็็นเที่ค์นิค์ที่างดีีเอ็็นเอ็ที่ี�จำำาเป็็นจำะต้อ็งมีการสักัดีและเพิ่ิ�มป็ริมาณ
(Primer) ที่ี�จำำาเพิ่าะเจำาะจำงกับสััตวิ์ต้อ็งห้ามนั�นๆ ซึ่่�งไพิ่รเมอ็ร์ ดีีเอ็็นเอ็เป็้าหมายก�อ็นนำาไป็ตรวิจำวิัดี ซึ่่�งในอ็นาค์ตผู่้วิิจำัยมีแผ่นที่ี�จำะต�อ็ยอ็ดี
จำะถููกดีัดีแป็ลงดี้วิยการติดี Tag sequence ในตำาแหน�ง 5’ ขอ็ง ช่ดีที่ดีสัอ็บนี�เพิ่ื�อ็ให้ผู่้บริโภค์ที่ั�วิไป็สัามารถูนำาไป็ใช้ตรวิจำสัอ็บอ็าหาร
สัาย Forward primer และติดีไบโอ็ติน (Biotin) ในตำาแหน�ง 5’ ฮาลาลดี้วิยตนเอ็งเพิ่ื�อ็เพิ่ิ�มค์วิามมั�นใจำในการบริโภค์ต�อ็ไป็
ขอ็งสัาย Reverse primer ดีังแสัดีงในภาพิ่ที่ี� 1 ซึ่่�งจำะเห็นไดี้วิ�า
ป็ฏิิกิริยาในการเพิ่ิ�มจำำานวินดีีเอ็็นเอ็ (Amplification) จำะมี
ที่ั�งหมดี 6 เป็้าหมาย ค์ือ็ ลิง สั่นัข หนูนา สั่กร แมวิ และตัวิแป็ร More Information Service Info C006
ค์วิบค์่มเชิงบวิก (Positive control)
หลังจำากที่ำาป็ฏิิกิริยา Amplification แล้วิ ดีีเอ็็นเอ็จำะถููกเพิ่ิ�ม

จำำานวินเป็็น 2 ตัวิ โดียที่ี� n ค์ือ็ จำำานวินรอ็บขอ็ง Cycle amplicon
n
และจำะไดี้ PCR product ที่ี�ถููกติดีดี้วิย Tag และไบโอ็ตินที่ี�
จำำาเพิ่าะขอ็งแต�ละชนิดี จำากนั�นจำะเข้าสัู�ขั�นตอ็นการย้อ็มสัี
(Color development) โดียเติมสัารละลาย Anti-biotin gold
conjugate และ Hybridization buffer ใน PCR product เพิ่ื�อ็
ให้ Anti-biotin gold conjugate ไป็จำับกับไบโอ็ตินที่ี�อ็ยู�บน PCR
product จำนติดีสัีแดีง เมื�อ็จำ่�มแผ่�นที่ดีสัอ็บดีีเอ็็นเอ็ที่ี�ถููกตร่ง
ดี้วิย Probe หรือ็ Anti-tag 6 แถูบหรือ็ 6 สัป็ีชีสั์ที่ี�เป็็นค์ู�สัม
(Complementary) กับ Tag ลงไป็ สัารละลายจำะไหลผ่�าน Tag
แล้วิเกิดีการแยกเพิ่ื�อ็ไป็จำับกับ Anti-tag ที่ี�เข้าค์ู�กัน เช�น Tag
ขอ็งลิงจำะไป็จำับเข้าค์ู�กับ Anti-tag ขอ็งลิงที่ี�ถููกตร่งไวิ้บนแผ่�น
ที่ดีสัอ็บ ที่ำาให้ป็ลายอ็ีกดี้านที่ี�เป็็นไบโอ็ตินไป็จำับกับ Anti-biotin
gold conjugate จำ่งเห็นเป็็นแถูบสัีแดีงป็รากฏิข่�นที่ี�บริเวิณเสั้น
ที่ดีสัอ็บ (ในกรณีที่ี�มีดีีเอ็็นเอ็ขอ็งสััตวิ์เป็้าหมายเที่�านั�น) จำากนั�น
สัารละลายที่ี�เหลือ็ก็จำะไหลผ่�าน Tag และ Anti-tag ขอ็งตัวิแป็ร
ค์วิบค์่มเชิงบวิกจำนเกิดีแถูบสัีแดีงข่�นเช�นกัน เพิ่ื�อ็เป็็นการยืนยัน
วิ�าการที่ำา PCR ค์รั�งนั�นไม�เกิดีข้อ็ผ่ิดีพิ่ลาดีในระหวิ�าง
การที่ดีสัอ็บ และสัารละลายสั�วินเกินจำะไหลผ่�านแล้วิถููกซึ่ับไวิ้

ที่ี�บริเวิณแผ่�นดีูดีซึ่ับ (Absorbing pad) ที่ั�งนี� จำะสัามารถูเห็น
ผ่ลลัพิ่ธี์หลังการที่ดีสัอ็บไดี้ดี้วิยตาเป็ล�า ในเวิลา 15 นาที่ี
หลังจำากการจำ่�มแผ่�นที่ดีสัอ็บลงใน PCR product และจำะใช้

MAY 2024 FOOD FOCUS THAILAND 53

23/4/2567 BE 17:32
51-56_Strong QC&QA_HSC_�����.indd 53 23/4/2567 BE 17:32
51-56_Strong QC&QA_HSC_�����.indd 53