Page 47 - FoodFocusThailand No.214 JANUARY 2024

STRONG QC & QA

การตรวจวิเคราะห์์วิตามิินบีีด้้วยวิธีีการ การตรวจวิเคราะห์์วิตามินบีีในอาห์ารสามารถูตรวจวัดโดยใช้้เคร่�องม่อได้ห์ลายวิธีี
ทางเคมิี ได้แก่ เคร่�องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ (Spectrophotometer) สเปกโตรฟลูออโรมิเตอร์
การตรวจวิเคราะห์์ห์าปริมาณวิตามินบีี (Spectrofluorometer) โครมาโทกราฟีของเห์ลวสมรรถูนะสูง (High Performance Liquid
ในอาห์ารตามวิธีีมาตรฐาน โดยใช้้วิธีีการทางเคมี Chromatography; HPLC) และโครมาโทกราฟีของเห์ลวสมรรถูนะสูงพื่ิเศษ (Ultra
ในการช้่วยสกัดสารจากตัวอย่าง เพื่่�อนำาไปตรวจ Performance Liquid Chromatography; UPLC) ที�มีความสามารถูในการตรวจวิเคราะห์์
วิเคราะห์์ห์าปริมาณวิตามิน ยกตัวอย่างเช้่น ตัวอย่างได้อย่างรวดเร็ว สามารถูรับีแรงดันได้มากกว่า อีกทั�งยังมีการใช้้สารเคมีและเวลา
ในกรณีที�มีการตรวจวิเคราะห์์ Thiamine (วิตามิน ที�น้อยกว่า HPLC ในขณะเดียวกันวิธีี UPLC นั�นจะมีการใช้้เคร่�องม่อที�มีราคาสูงกว่า
บีี 1) ในอาห์ารมนุษย์และสัตว์เลี�ยง ตามวิธีีการ ดังนั�น จ่งนิยมใช้้วิธีี HPLC ในการตรวจสอบีห์าวิตามินบีีในอาห์าร
ของ AOAC 942.23 ซึ่่�งมีขั�นตอนดังนี�
1
1. ช้ั�งตัวอย่าง และเติม Hydrochloric Acid
0.1 โมล
2. นำาไปให์้ความร้อนในอ่างควบีคุมอุณห์ภููมิ
ที� 95-100 องศาเซึ่ลเซึ่ียส เป็นเวลา 30 นาที
3. ทำาให์้เย็น และปรับี pH ให์้อยู่ในช้่วง 4.0-
4.5 ห์ลังจากนั�นเติมสารละลายเอนไซึ่ม์ Takadi-
estase
4. นำาไปบี่มที�อุณห์ภููมิ 45-50 องศาเซึ่ลเซึ่ียส
นาน 3 ช้ั�วโมง
5. ทำาให์้เย็นแล้วปรับีปริมาตรให์้ครบี 100
มิลลิลิตรด้วยนำ�า และกรองสารละลายผ่่าน
กระดาษกรอง
6. เติมสารละลายที�ผ่่านการกรองลงใน
Potassium Chloride ห์ร่อ Sodium Chloride

และ Oxidizing Reagent (Potassium
Ferricyanide) โดย Thiamine จะถููกเปลี�ยนเป็น
Thiochrome ซึ่่�งมีคุณสมบีัติเป็นสารเร่องแสง
จ่งเป็นวิธีีที�ใช้้สำาห์รับีการวัดปริมาณวิตามินบีี 1
ในอาห์าร
สำาห์รับีการตรวจวิเคราะห์์แต่ละครั�งจะต้อง
มีการควบีคุมคุณภูาพื่ภูายใน (Internal Quality
Control) ของห์้องปฏิิบีัติการในการเฝ้้าระวัง
การตรวจวิเคราะห์์ เพื่่�อให์้ผ่ลการตรวจวิเคราะห์์
มีความน่าเช้่�อถู่อ ซึ่่�งมีห์ลายห์ลักเกณฑ์์ที�ได้รับี
การยอมรับี เช้่น การวิเคราะห์์ซึ่ำ�า (Duplicates)
การวิเคราะห์์การค่นกลับีของสาร (%Reco-
very) การทดสอบีแบีลงค์ของสารเคมี
(Reagent Blank) การใช้้วัสดุอ้างอิงรับีรอง
(Certified Reference Materials) เพื่่�อทวนสอบี
วิธีีการตรวจสอบีสมรรถูนะของเคร่�องม่อ
และการทดสอบีสารมาตรฐาน โดยการสร้าง
กราฟมาตรฐาน (Calibration Curve) ว่ามีความ

สัมพื่ันธี์ที�เป็นเส้นตรง (Linearity) ห์ร่อไม่
เป็นต้น

JAN 2024 FOOD FOCUS THAILAND 47

20/12/2566 BE 19:02
46-50_Strong QC&QA.indd 47 20/12/2566 BE 19:02
46-50_Strong QC&QA.indd 47