Page 53 - FoodFocusThailand No.176 November 2020

STRONG QC & QA

วิิธีีการเลืือกเทคนิิคทาง molecular
ทุกชนิิดมาใช้ เพื่ื�อตรวิจวิิเคราะห์์ตัวิอย่่าง LAMP Technique
เพื่ื�อการประกันิผลืการทดสอบแลืะมั�นิใจ
ในิควิามถููกต้องของผลืการทดสอบนิั�นิ for Pathogen Testing
จึงมีข้อแนิะนิำาห์้องปฏิิบัติการในิการเลืือก
วิิธีีทดสอบเพื่ิ�มเติม ดังนิี� in Food
• เพื่ื�อช่วิย่ลืดควิามเสี�ย่งผลืลืบปลือม
แลืะจากการปฏิิบัติงานิผิดพื่ลืาด ควิรเลืือก
ชุดทดสอบแบบพื่ร้อมใช้งานิ แลืะ Even though the world is coping with COVID-19 pandemic, Centers for
ควิรเป็นิวิิธีีที�ไม่ซัับซั้อนิ มีขั�นิตอนิง่าย่ๆ Disease Control and Prevention, USA, as well as other experts have not
กับการวิิเคราะห์์ทุกเชื�อ found the evidence that COVID-19 is transmitted via food.
• มีขั�นิตอนิการทำา Positive แลืะ
Negative Control ทุกครั�งที�ทำาการทดสอบ Therefore, microorganisms such as bacteria and viruses are most common found, and
เพื่ื�อควิบคุมประสิทธีิภาพื่ แลืะควิาม- mainly cause of foodborne diseases. Urgently, the contamination of pathogenic microorganisms
นิ่าเชื�อถูือของการทดสอบนิั�นิๆ in export food products is still a major problem in Thailand that requires an immediate action.
Continuously warned, the importer of destination country often found the contamination in some
• ลืดโอกาสที� Amplicon ฟุุ้�งกระจาย่ products. If the problem is left unsolved, it may cause the problem to overall Thai exports.
ในิสิ�งแวิดลื้อมแลืะอุปกรณ์์ภาย่ในิห์้อง- Primarily, the most concerns of pathogens in exporting foods are Salmonella spp., Listeria
ปฏิิบัติการ โดย่เป็นิเทคนิิคที�ไม่ต้องเปิด monocytogenes, E.coli O157, Vibrio cholera, Vibrio parahaemolyticus, etc.
ห์ลือดห์ลืังการเพื่ิ�ม DNA target เป็นิต้นิ One prominent technique for pathogen analysis is Loop-mediated isothermal amplification,
or shortly called - LAMP, which was developed by Japanese researchers. Prof.Tsugunori Notomi
and his team since 2000. This testing technology has been internationally accepted and
published over 800 editions. It is fast, easy to
use, and very accurate. It is more stable
compared to the traditional PCR method. This
stability has a less interference in samples from
both food and the environment, unlike the
traditional PCR method.
In principle, LAMP is based on the function
between Bst DNA Polymerase enzyme
-capable of making a single strand of nucleotide
at 60 C, and 4-6 strands of primers -capable
o
of binding in specific target genes up to 6
positions. This synergy creates a highly specific
LAMP product. This reaction does not require
แลืะที�สำาคัญ การวิิเคราะห์์เชื�อก่อโรค any expensive equipment such as a thermal cycler or PCR machine, making LAMP an
ย่ังพื่บวิ่ามีปัจจัย่ห์ลืาย่อย่่างที�อาจส่ง increasingly popular technique.
ผลืกระทบต่อการทดสอบได้ เช่นิ การสุ่ม- The selection technique of all type molecular to analyze samples to ensure test results,
ตัวิอย่่าง การเก็บรักษาตัวิอย่่าง การเตรีย่ม- and to confirm the test accuracy requires some following recommendations for laboratory.
• To reduce a risk of false negative reading and an operation mistake, ready-to-use test
ตัวิอย่่าง ขั�นิตอนิการบ่มเชื�อ ขั�นิตอนิ kit should be operated. The test should be simple with few steps to follow for all analysis.
การทดสอบ รวิมถูึงการย่ืนิย่ันิผลืการ- • There must be a procedure of positive and negative control in every test. This is to control
ทดสอบอีกด้วิย่ ดังนิั�นิ ผู้วิิเคราะห์์ก็ต้องมี the effectiveness and the reliability of particular test.
วิิธีีการจัดการแลืะดูแลืทุกๆ ขั�นิตอนิ • The test should be done in confined container to reduce the chance of amplicon diffusing
อย่่างถููกต้อง เห์มาะสม ตรงตามมาตรฐานิ in laboratory equipment and the environment. LAMP technique does not need to open the tube
after adding DNA target.
ไม่ใช่ดูแลืเพื่ีย่งแค่ขั�นิตอนิใดขั�นิตอนิห์นิึ�ง More importantly in the pathogen analysis, there are many factors that may deviate the test
เท่านิั�นิ ผลืการทดสอบที�ได้จึงจะมีควิาม- result, such as sampling method, sample storage, sample preparation, incubation process,
ถููกต้องแม่นิย่ำา testing procedure, as well as, the test reading and confirmation. Therefore, an analyst must
have a good control to manage and maintain all procedures to meet the standards. The test
shall be taken care of every step, so that the analysis result can be precisely accurate.

NOV 2020 FOOD FOCUS THAILAND 53

22/10/2563 BE 15:29
52-53_Strong QC&QA_3M.indd 53 22/10/2563 BE 15:29
52-53_Strong QC&QA_3M.indd 53